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當(dāng)前位置：首頁(yè) > 公司新聞 Polysciences是一家化學(xué)品制造公司，在國(guó)際上享有盛譽(yù)。可提供各種生命科學(xué)、生物加工、微粒子、醫(yī)療器械、特種化學(xué)品和電子化學(xué)品等領(lǐng)域的產(chǎn)品和定制解決方案。Polysciences的產(chǎn)品不僅效率高，而且穩(wěn)定可靠，為廣大科研人員提供了堅(jiān)實(shí)的技術(shù)支撐。
Polysciences提供從科研級(jí)到GMP級(jí)轉(zhuǎn)染試劑，可用于基因轉(zhuǎn)染、蛋白表達(dá)和RNA干擾等研究方向。Polysciences科研級(jí)轉(zhuǎn)染試劑有兩種分子量，分別是Polyethylenimine, Linear, MW 25000(即PEI 25K)和Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride，MW 40,000(即PEI MAX)。
一、Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑的優(yōu)勢(shì)
·轉(zhuǎn)染效率高，細(xì)胞毒性低；
·蛋白表達(dá)量高；
·節(jié)約成本：PEI至少能夠降低40%的轉(zhuǎn)染試劑總成本；
·適用于HEK293等真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)染；
·適用于貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染；
·適用于有血清和無(wú)血清的轉(zhuǎn)染條件；
·無(wú)機(jī)試劑，無(wú)動(dòng)物源成分；
·產(chǎn)品穩(wěn)定，質(zhì)控嚴(yán)格；
·工藝流程適用范圍廣，容易優(yōu)化，適合小規(guī)模培養(yǎng)板、培養(yǎng)瓶到大規(guī)模的生物反應(yīng)器。
二、Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑使用方法
以293T貼壁細(xì)胞為例：
1.細(xì)胞準(zhǔn)備：
使用膠原酶處理細(xì)胞并計(jì)數(shù)。在6孔板中以每孔2×106細(xì)胞接種，置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h。24h后，移除之前培養(yǎng)基，每孔加入2mL新鮮的DMEM：F12+5%FBS。
2.轉(zhuǎn)染過(guò)程：
(1)檢查細(xì)胞匯合度，達(dá)到70%-80%時(shí)開(kāi)始轉(zhuǎn)染。
(2)分別用兩份100μL無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋DNA，使DNA終濃度為1ug/ml（DNA/總培養(yǎng)體積）和適當(dāng)比例的Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑。DNA:PEI 的比例要依據(jù)自己實(shí)驗(yàn)摸索最適比例。
(3)將稀釋的Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒（總體積 200μL）輕輕混勻，室溫孵育30分鐘。
(4)PEI-DNA復(fù)合物滴加到細(xì)胞培養(yǎng)板每個(gè)孔中，輕搖混勻。注意輕輕沿著孔板邊緣滴入，不是在細(xì)胞的頂部以免破壞細(xì)胞的粘附性。
(5)將培養(yǎng)板放入 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)中培養(yǎng)24h。
3.結(jié)果觀察：
在24小時(shí)后使用熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效果，超過(guò)80%的293T細(xì)胞在轉(zhuǎn)染后的24h可以觀察到綠色熒光。
三、使用時(shí)的注意事項(xiàng)：
1.對(duì)于不同的細(xì)胞培養(yǎng)條件，需要做出相應(yīng)的優(yōu)化。
2.轉(zhuǎn)染過(guò)程中要小心細(xì)胞的受損和污染問(wèn)題。
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